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崔佳雯 (崔佳雯.) | 毛怡心 (毛怡心.) | 马晶 (马晶.) | 贾润清 (贾润清.) | 余双庆 (余双庆.) | 张晓梅 (张晓梅.) | 常占军 (常占军.) | 戴蕾 (戴蕾.) | 李喜英 (李喜英.)

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Abstract:

目的 通过建立新型人源化抗HIV-1 P24单克隆抗体制备技术平台,研制1~2种抗HIV-1 P24抗体.方法 使用连接P24的磁珠分选特异性分泌P24抗体的B细胞,有限稀释后,提取总mRNA,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vector AbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中;通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体;使用proteinA亲和层析纯化抗体.结果 成功筛选到5对抗HIV-1 P24的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化HIV-1 P24单克隆抗体的制备及纯化方法,为HIV早期诊断以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.

Keyword:

抗体,单克隆 酶联免疫吸附测定 逆转录聚合酶链反应 HIV-1

Author Community:

  • [ 1 ] [崔佳雯]北京工业大学
  • [ 2 ] [毛怡心]北京工业大学
  • [ 3 ] [马晶]中国疾病预防控制中心
  • [ 4 ] [贾润清]中国疾病预防控制中心
  • [ 5 ] [余双庆]中国疾病预防控制中心
  • [ 6 ] [张晓梅]中国疾病预防控制中心
  • [ 7 ] [常占军]郑州市疾病预防控制中心
  • [ 8 ] [戴蕾]郑州市疾病预防控制中心
  • [ 9 ] [李喜英]郑州市疾病预防控制中心

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Source :

中华实验和临床病毒学杂志

ISSN: 1003-9279

Year: 2014

Issue: 5

Volume: 28

Page: 392-394

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