Nitrite　(NO2　(-)-N)　accumulation　in　denitrification　can　provide　the　substrate　for　anammox,　an　efficient　and　cost-saving　process　for　nitrogen　removal　from　wastewater.　This　batch-mode　study　aimed　at　achieving　high　NO2　(-)-N　accumulation　over　long-term　operation　with　the　acetate　as　sole　organic　carbon　source　and　elucidating　the　mechanisms　of　NO2　(-)-N　accumulation.　The　results　showed　that　the　specific　nitrate　(NO3　(-)-N)　reduction　rate　(59.61　mg　N　VSS-1　h(-1)　at　NO3　(-)-N　of　20　mg/L)　was　much　higher　than　specific　NO2　(-)-N　reduction　rate　(7.30　mg　N　VSS-1　h(-1)　at　NO3　(-)-N　of　20　mg/L),　and　the　NO2　(-)-N　accumulation　proceeded　well　at　the　NO3　(-)-N　to　NO2　(-)-N　transformation　ratio　(NTR)　as　high　as　90　%.　NO2　(-)-N　accumulation　was　barely　affected　by　the　ratio　of　chemical　oxygen　demand　(COD)　to　NO3　(-)-N　concentration　(C/N).　With　the　addition　of　NO3　(-)-N,　NO2　(-)-N　accumulation　occurred　and　the　specific　NO2　(-)-N　reduction　rate　declined　to　a　much　lower　level　compared　with　the　value　in　the　absence　of　NO3　(-)-N.　This　indicated　that　the　denitrifying　bacteria　in　the　system　preferred　to　use　NO3　(-)-N　as　electron　acceptor　rather　than　use　NO2　(-)-N.　In　addition,　the　Illumina　high-throughput　sequencing　analysis　revealed　that　the　genus　of　Thauera　bacteria　was　dominant　in　the　denitrifying　community　with　high　NO2　(-)-N　accumulation　and　account　for　67.25　%　of　total　microorganism.　This　bacterium　might　be　functional　for　high　NO2　(-)-N　accumulation　in　the　presence　of　NO3　(-)-N.