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姚志伟 (姚志伟.) | 李丹 (李丹.) | 马保瑞 (马保瑞.) | 张杰 (张杰.) | 孙春昀 (孙春昀.) | 谢良志 (谢良志.) | 盖文琳 (盖文琳.) | 盛望 (盛望.)

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摘要:

目的 对人源化抗肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)单克隆抗体进行初步鉴定,并对其体内、外抗肿瘤活性及药代动力学特征进行研究.方法 将基因工程技术制备的2株抗HGF人源化单克隆抗体HE19-12和HD19-27,通过UV、SDS-PAGE方法对其质量浓度、相对分子质量及纯度进行鉴定;MTT法评价抗体对人脑胶质瘤U87MG细胞的增殖抑制活性,并比较抗体人源化前后活性差异;采用ELISA法评价抗体结合HGF及竞争抑制HGF与受体结合的能力;Transwell法研究抗体对HGF促进PC-3细胞迁移的抑制能力;通过构建U87MG裸鼠移植瘤模型,比较抗体在体内的抗肿瘤作用;抗体通过静脉给予正常小鼠,分析其药代动力学特征.结果 2株抗体单体纯度均达到90%以上,均可抑制U87MG肿瘤细胞增殖,且人源化前后抗体活性差异不大.2株抗体均与HGF具有较强的结合能力,且可竞争抑制HGF与其受体C-Met的结合.细胞迁移实验显示,2株抗体具有抑制HGF促肿瘤细胞迁移的能力.裸鼠移植瘤试验显示HGF抗体可有效抑制肿瘤的生长,其中HE19-12在试验中显示更好的抗肿瘤活性.小鼠药代结果显示,HE19-12和HD19-27的半衰期分别为423.3 h和342.5 h.结论 成功对制备出的2株人源化单克隆抗体进行初步鉴定及一系列抗肿瘤活性研究,证明具有较强抗肿瘤活性的HGF中和抗体,且具有良好的药代动力学特征,为HGF/C-Met靶点抗肿瘤药物的开发奠定基础.

关键词:

单克隆抗体 人源化 抗肿瘤 HGF

作者机构:

  • [ 1 ] [姚志伟]北京工业大学
  • [ 2 ] [李丹]神州细胞工程有限公司
  • [ 3 ] [马保瑞]神州细胞工程有限公司
  • [ 4 ] [张杰]神州细胞工程有限公司
  • [ 5 ] [孙春昀]神州细胞工程有限公司
  • [ 6 ] [谢良志]神州细胞工程有限公司
  • [ 7 ] [盖文琳]神州细胞工程有限公司
  • [ 8 ] [盛望]北京工业大学

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来源 :

免疫学杂志

ISSN: 1000-8861

年份: 2017

期: 5

卷: 33

页码: 437-442

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