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目的构建人核糖体蛋白RPS3及其Ser209突变体的真核表达载体,初步探讨RPS3Ser209突变体对NF-κB转录活性及其DNA结合能力的影响。方法采用高保真PCR扩增RPS3的CDS序列,克隆入pc DNA-3.1mycHis B载体,构建RPS3-myc表达载体。以构建成功的RPS3-myc质粒为模板,采用点突变方法构建RPS3Ser209突变体RPS3S209A-myc表达载体。报告基因实验检测RPS3及RPS3S209A对NF-κB转录活性的影响;共聚焦显微镜观察RPS3及RPS3S209A的细胞定位;EMSA实验检测RPS3及RPS3S209A的DNA结合能力。结果成功构建RPS3...
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