烟草特异亚硝胺4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)是一种存在于烟草烟气及烟草制品中的强致癌物,其致癌机理是通过细胞色素P450酶的代谢活化生成活泼亲电试剂,导致DNA损伤,因此,建立NNK体外模拟代谢产物的定量分析方法对于研究烟草致癌物具有重要意义.本实验利用高效液相色谱-大气压化学电离串联质谱法(HPLC-APCI-MS/MS)对NNK代谢产物4-羟基-1-(3吡啶基)-1-丁酮(HPB)进行定量分析.使用选择反应扫描(SRM)模式监测了HPB和内标[3,3,4,4-D4]　HPB,分析方法在0.2～400　nmol/L范围内线性关系良好,线性相关系数R2=0.999　9,检出限(LOD)为0.025　nmol/L(S/N=3),定量限(LOQ)为0.05　nmol/L(S/N=10).方法的日内和日间准确度为96.6％～101.8％,回收率为98.1％～102.6％.所建立的NNK体外模拟代谢模型可用于烟草特异亚硝胺代谢活化分子机制的研究,为定量分析吸烟致癌相关生物标志物奠定基础.