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毛怡心 (毛怡心.) | 崔佳雯 (崔佳雯.) | 马晶 (马晶.) | 贾润清 (贾润清.) | 余双庆 (余双庆.) | 张晓梅 (张晓梅.) | 常占军 (常占军.) | 戴蕾 (戴蕾.) | 李喜英 (李喜英.)

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摘要:

目的 通过建立新型人源化单克隆抗体制备技术平台,筛选抗EV71 VP1单克隆抗体.方法 使用耦联EV71 VP1抗原的磁珠对EV71感染者外周血淋巴细胞进行分选,得到分泌EV71VP1特异性抗体的B淋巴细胞.有限稀释后,低渗裂解细胞,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vectorAbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中.通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体.结果 成功筛选到1对抗EV71 VP1的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化单克隆抗体的筛选方法,为手足口病早期诊断、治疗以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.

关键词:

聚合酶链反应 抗体,单克隆 肠道病毒属

作者机构:

  • [ 1 ] [毛怡心]北京工业大学
  • [ 2 ] [崔佳雯]北京工业大学
  • [ 3 ] [马晶]中国疾病预防控制中心
  • [ 4 ] [贾润清]中国疾病预防控制中心
  • [ 5 ] [余双庆]中国疾病预防控制中心
  • [ 6 ] [张晓梅]中国疾病预防控制中心
  • [ 7 ] [常占军]郑州市疾病预防控制中心
  • [ 8 ] [戴蕾]郑州市疾病预防控制中心
  • [ 9 ] [李喜英]郑州市疾病预防控制中心

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来源 :

中华实验和临床病毒学杂志

ISSN: 1003-9279

年份: 2014

期: 5

卷: 28

页码: 389-391

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