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刘斌 (刘斌.) | 刘昕 (刘昕.) | 李杉 (李杉.) | 何红秋 (何红秋.) | 张小轶 (张小轶.) | 谭建军 (谭建军.) | 陈慰祖 (陈慰祖.) | 王存新 (王存新.)

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CQVIP PKU CSCD

摘要:

整合酶被认为是抗HIV-1药物研究的理想靶点之一。为了建立便捷高效的整合酶链转移反应抑制剂筛选方法,首先将HIV-1整合酶原核表达载体pNL-IN转化入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)进行原核表达,并用镍琼脂糖凝胶进行亲和纯化,获得了纯度和活性均较高的整合酶重组蛋白;然后设计了生物素标记的供体DNA和FITC标记的靶DNA,用链霉亲和素磁珠捕获反应体系中的DNA产物;最后用荧光分析仪检测DNA产物的荧光信号,并计算待测样品的抑制率。用已知整合酶抑制剂S-1360和MK-0518对筛选方法进行了验证,测定结果与已有实验数据相当,表明本筛选方法能够有效应用于HIV-1整合酶链转移反应抑制剂的筛...

关键词:

HIV-1 抑制剂筛选 整合酶 链转移

作者机构:

  • [ 1 ] 北京工业大学生命科学与生物工程学院
  • [ 2 ] 重庆市科学技术研究院重庆生物医药与器械研究中心

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来源 :

中国生物工程杂志

年份: 2013

期: 01

卷: 33

页码: 67-71

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