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董小明 (董小明.) | 郑巍薇 (郑巍薇.) | 尹荣华 (尹荣华.) | 詹轶群 (詹轶群.) | 杨晓明 (杨晓明.) | 李长燕 (李长燕.)

收录:

CQVIP PKU CSCD

摘要:

为揭示红系分化相关基因(erythroid differentiation-associated gene,EDAG)在造血中的作用机制,利用ChIP-seq分析EDAG的全基因组结合谱.首先从产妇脐带血分离CD34+细胞,EPO诱导CD34+细胞培养5d.利用EDAG抗体进行染色体免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验、Western印迹法检测EDAG抗体的富集情况.将富集到的DNA样品进行高通量测序,最后利用生物信息学分析测序结果.成功富集染色体DNA,经高通量测序和生物信息学分析,共得到1 292个EDAG结合位点的Peaks数目,代表了975个结合的基因且错误发现率(false discovery rate,FDR)小于0.0001.EDAG Peaks主要分布在基因间区和内含子区.进一步利用Q-PCR对ChIP-Seq数据进行了验证,证实EDAG可结合在检测的靶基因调控区上.将EDAG结合的基因进行基因功能(gene ontology,GO)注释,表明EDAG参与了细胞周期、细胞生长、细胞分化、细胞凋亡及信号通路等多种生物学过程.综上,利用ChIP-seq技术在促红细胞生成素(EPO)诱导分化的CD34+细胞中鉴定了1 292个EDAG结合的peaks对应975个基因,并对该结果进行了随机验证,提示EDAG广泛参与了多种生物学过程.该研究为揭示EDAG的功能及作用机制提供了线索.

关键词:

CD34+细胞 染色体免疫共沉淀-高通量测序(ChIP-seq) 生物信息学分析 红系分化相关基因(EDAG)

作者机构:

  • [ 1 ] [董小明]北京工业大学
  • [ 2 ] [郑巍薇]解放军军事医学科学院
  • [ 3 ] [尹荣华]解放军军事医学科学院
  • [ 4 ] [詹轶群]解放军军事医学科学院
  • [ 5 ] [杨晓明]解放军军事医学科学院
  • [ 6 ] [李长燕]解放军军事医学科学院

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来源 :

中国生物化学与分子生物学报

ISSN: 1007-7626

年份: 2013

期: 6

卷: 29

页码: 578-584

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