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CQVIP PKU CSCD

摘要:

pEGFP-C3质粒经过体外人工甲基化处理后,被转染进入HepG2细胞以构建重组细胞株.以5-AZA为阳性去甲基化毒物与重组细胞共培养,通过亚硫酸氢钠测序法定量检测EGFP基因启动子区甲基化状态,通过实时定量PCR检测EGFP基因表达,借助流式细胞术和荧光摄片定量检测共培养细胞的绿色荧光强度,在DNA甲基化、EGFP基因mRNA表达、GFP蛋白等多个层次研究5-AZA染毒处理与其去甲基化能力和荧光表达改变的响应关系.对天津污染水产的去甲基化能力进行了实际样品测试.结果表明,5-AZA与重组细胞的DNA甲基化、基因表达、蛋白产物变化之间存在显著关联,具有较低的检出浓度和良好的重复性.天津污染海域...

关键词:

EGFP 去甲基化 污染物 表观遗传毒性 评价载体

作者机构:

  • [ 1 ] 环境基准与风险评估国家重点实验室中国环境科学研究院
  • [ 2 ] 安徽医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生系
  • [ 3 ] 厦门大学海洋与环境学院
  • [ 4 ] 北京工业大学生命科学与生物工程学院

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来源 :

中国科学:化学

年份: 2011

期: 09

卷: 41

页码: 1548-1554

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