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周媛 (周媛.) | 贾润清 (贾润清.) | 滕智平 (滕智平.) | 张晓梅 (张晓梅.) | 曾毅 (曾毅.)

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摘要:

目的 构建新城疫病毒LaSota株NP、P基因的真核表达载体,为研究NP、P蛋白机理及反向遗传操作系统奠定基础.方法 利用RT-PCR法扩增出新城疫病毒LaSota株的NP、P基因,并将其克隆到pGEM-T easy载体中,并再次亚克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA3.1(+)-NP、pcDNA3.1(+)-P,瞬时转染到293、BHK-21 细胞中,免疫酶法及Western Blot法检测表达情况.结果 经免疫酶法及Western Blot法分别检测到了P、NP蛋白在两种细胞的表达.结论 构建的两个重组质粒pcDNA3.1(+)-NP、pcDNA3.1(+)-P 在293、BHK-21两种细胞中均可稳定表达,为即将进行的NDV反向遗传操作系统奠定基础.

关键词:

病毒蛋白质类 反向遗传操作系统 新城疫病毒

作者机构:

  • [ 1 ] [周媛]北京工业大学
  • [ 2 ] [贾润清]北京工业大学
  • [ 3 ] [滕智平]中国疾病预防控制中心
  • [ 4 ] [张晓梅]中国疾病预防控制中心
  • [ 5 ] [曾毅]中国疾病预防控制中心

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来源 :

中华实验和临床病毒学杂志

ISSN: 1003-9279

年份: 2010

期: 1

卷: 24

页码: 62-64

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