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杨海儒 (杨海儒.) | 冯霞 (冯霞.) | 余双庆 (余双庆.) | 张晓光 (张晓光.) | 张晓梅 (张晓梅.) | 陈国敏 (陈国敏.) | 李泽琳 (李泽琳.) | 曾毅 (曾毅.)

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PKU CSCD

摘要:

目的 制备HIV-1 C亚型Gp120蛋白及其抗体.方法 用PCR技术从表达C亚型HIV-1全长gp16O基因的质粒上扩增gP120基因羧基末端部分片段,其长度为612个核苷酸,编码204个氨基酸.将测序鉴定正确的gp120基因片段克隆到原核表达载体pET-30a上,以包涵体的形式在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,Gp120蛋白C端融合6×His标签便于纯化.将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备C亚型Gp120特异性兔多克隆抗体,用间接ELISA法测定抗体滴度,并用Western Blot方法验证该抗体是否可识别在哺乳动物细胞内表达的C亚型Gp160蛋白.结果 成功地获得高纯度的C亚型Gp120融合蛋白,用其制备的多克隆抗体滴度可达1:204 800,该抗体可特异性识别在COS-1细胞中瞬时表达的C亚型Gp160蛋白.结论 获得了高纯度的C亚型Gp120融合蛋白及其高效价的抗体.

关键词:

抗体,病毒 HIV 基因表达 病毒包膜蛋白质类

作者机构:

  • [ 1 ] [杨海儒]中国疾病预防控制中心
  • [ 2 ] [冯霞]中国疾病预防控制中心
  • [ 3 ] [余双庆]中国疾病预防控制中心
  • [ 4 ] [张晓光]中国疾病预防控制中心
  • [ 5 ] [张晓梅]中国疾病预防控制中心
  • [ 6 ] [陈国敏]中国疾病预防控制中心
  • [ 7 ] [李泽琳]北京工业大学
  • [ 8 ] [曾毅]中国疾病预防控制中心

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来源 :

中华实验和临床病毒学杂志

ISSN: 1003-9279

年份: 2009

期: 2

卷: 23

页码: 94-96

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