摘要:
目的 建立对双链DNA(dsDNA)进行定量的方法.方法 将SYBR Green Ⅰ与不同浓度dsDNA混合后检测荧光强度并建立荧光强度与dsDNA浓度的标准曲线,同时检测RNA、单链DNA(ssDNA)、蛋白质以及实验中常见的其他物质对dsDNA定量结果的影响.结果 当dsDNA浓度为50~2 000 ng·mL-1时,荧光强度与dsDNA浓度有良好的线性关系(Y=11.375X-266.13,r=0.999 76).并且定量结果不易受到ssDNA、RNA、蛋白质或其他物质的干扰.结论 用荧光染料SYBR Green Ⅰ对dsDNA进行定量具有特异性好、灵敏度高、能实现高通量等优点,是一种理想的核酸定量方法.
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