摘要:
DNA的分离和分析在分子生物学领域起着极其重要的作用。长期以来研究者们一直孜孜不倦地探索经济有效的DNA分离和检测的方法服务于基础研究和临床诊断。由于当DNA链长大于~400碱基时,它们具有近乎相同的荷质比,在自由溶液中具有相同的迁移率,因此无法通过电泳的方法将它们分离。凝胶电泳一直是DNA的经典分离方法,但是该方法存在着成本高、步骤繁杂、费时费力、进样量大等缺点。我们提出利用微纳毛细管色谱分离方法实现在自由溶液中、无筛分介质、无毛细管壁修饰、无"拖曳标签"的条件下DNA分子在很宽碱基范围内的快速色谱分离[1-3]。分离效率高,每米理论塔板数达到百万。实验所使用的毛细管是无需涂壁修饰的,只要毛细管不被损坏,毛细管柱的实际使用寿命就是无限的。一次分离仅消耗飞升到皮升级的样品和纳升级别体积的洗脱液(缓冲溶液),而且所产生的废液量几乎是可以忽略不计的,因此分离耗费低。实验所取得的结果比凝胶电泳和脉冲场电泳具有更高的分离效率和更短的分析时间。因此我们建立了生物大分子在自由溶液中的分离新方法。
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