摘要：
目的构建用于高甲基化重组质粒载体并借此研究污染物去甲基化表观遗传毒性评价方法。方法 pEGFP-C3质粒经过体外人工甲基化处理后,被转染进入HepG2细胞以构建重组细胞株;以5-AZA为阳性去甲基化毒物与重组细胞共培养,通过亚硫酸氢钠测序法定量检测EGFP基因启动子区甲基化状态,通过实时定量PCR定量检测EGFP基因表达,借助流式细胞术和荧光定量摄片定量检测共培养细胞的绿色荧光强度,在DNA甲基化、EGFP基因mRNA表达、GFP蛋白等多个层次研究5-AZA染毒处理与其去甲基化能力和荧光表达改变的响应关系。并借此对大津污染水产的去甲基化能力进行了实际样品测试。结果 5-AZA与重组细胞的DNA...
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