本发明涉及禹白附抗艾滋病的新用途及其有效部位的提取分离方法。该方法是取原生药材，用30％乙醇萃取，上清干燥；取干粉进行大孔树脂柱层析，得到AA、AB、AC、AD、AE　5种部位，其中AB和AC为有效部位；取AB　300mg进行葡聚糖凝胶柱层析，共收集10个流份，根据薄层合瓶，取2、3、4瓶150mg再进行反相C－18柱层析，用水、水∶甲醇分别为8∶2、6∶4、4∶6、2∶8的甲醇溶液及纯甲醇依次洗脱，其中水∶甲醇＝2∶8的洗脱物为有效部位A302；取AC　200mg进行葡聚糖凝胶柱层析，共收集10个流份，根据薄层合瓶，其中第6、7流份为有效部位B6。本发明的实验表明禹白附30％乙醇提取物及有效部位AB、AC、A302和B6具有很好的抗艾滋病病毒的活性，可用于制备抗艾滋病的药物。