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一种利用流体动力色谱同时分离检测多组microRNA的方法，属于生物化学领域。包括以下步骤：1)确定多组microRNA，设计互补配对的ssDNA序列，第一条ssDNA完全与第一条microRNA互补配对，第二条ssDNA在互补链碱基个数的基础上增加若干个碱基，作为分离标签，以此类推；2)将多组microRNA混合物与相对应设计好的互补ssDNA杂交，杂交后加入核酸荧光染料，发出强荧光信号；3)多组杂交后的双链混合物，通过低气压进样，并在高气压驱动下，在微纳毛细管内完成色谱分离，最后在毛细管尾端窗口完成定量检测。本发明方法可实现多组microRNA色谱分离，并进行实时高灵敏快速检测。
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